Bio-Rad_PTC-200 PCR儀可以根據(jù)不同的DNA的片段及其引物，設(shè)計(jì)不同的擴(kuò)增條件，從而實(shí)現(xiàn)樣本DNA在Taq酶的作用下達(dá)到指數(shù)性的增長(zhǎng)。廣泛應(yīng)用于序列測(cè)定、遺傳分析、醫(yī)療診斷等樣品的前處理。
PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度（72°C左右），DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈。PCR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備，能在95℃，55℃，72℃之間很好地進(jìn)行溫度控制。PCR擴(kuò)增儀又稱為PCR基因擴(kuò)增儀、PCR核酸擴(kuò)增儀、聚合酶鏈反應(yīng)核酸擴(kuò)增儀，是利用PCR(Polymerasechainreaction，聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)對(duì)特定DNA擴(kuò)增的一種儀器設(shè)備，被廣泛運(yùn)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中，例如用于判斷檢體中是否會(huì)表現(xiàn)某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復(fù)制以及親子鑒定等。
Bio-Rad_PTC-200 PCR儀反應(yīng)步驟：
分別是：1.Denaturation2.Annealingofprimers,3.Extensionofprimers。所謂Denaturing乃是將DNA加熱(至90~95℃)變性，將雙股的DNA加熱后轉(zhuǎn)為單股DNA以做為復(fù)制的模板.而Annealing則是令Primers于一定的溫度下(冷卻至55~60℃)附著于模板DNA兩端。最后在DNA聚合酶e.g.Taq-polymerase的作用下(加熱至70~75℃)進(jìn)行引物的延長(zhǎng)Extensionofprimers及另一股的合成。
PCR的最早設(shè)想核酸研究已有100多年的歷史，二十世紀(jì)60年代末、70年代初人們致力于研究基因的體外分離技術(shù)，Korana于1971年最早提出核酸體外擴(kuò)增的設(shè)想:"經(jīng)過(guò)DNA變性，與合適的引物雜交，用DNA聚合酶延伸引物，并不斷重復(fù)該過(guò)程便可克隆tRNA基因"。
PCR技術(shù)的本質(zhì)是體外核酸擴(kuò)增，加熱使雙鏈DNA解開(kāi)螺旋，在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交，在TaqDNA聚合酶，dNTPs，Mg2+和合適pH緩沖液存在條件下延伸引物，重復(fù)“變性→退火→引物延伸”過(guò)程至25～40個(gè)循環(huán)，呈指數(shù)級(jí)擴(kuò)大待測(cè)樣本中的核酸拷貝數(shù)。
